还原型谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)试剂盒说明书下载
测定意义:
GSH 是细胞内最主要的抗氧化巯基物质,在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运输等中具有重要
作用。还原型与氧化型比值(GSH/GSSG)是细胞氧化还原状态的主要动态指标。因此,测定细胞内GSH
和 GSSG 含量以及GSH/GSSG 比值,能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。
测定原理:
DTNB 与 GSH 反应生成复合物,在 412nm 处有特征吸收峰;其吸光度与GSH 含量成正比。
组成:
产品名称 GSH002-100T/96S Storage
试剂一:液体 1 瓶 4℃
试剂二:液体 1 瓶 4℃
试剂三:液体 1 瓶 4℃避光
说明书 一份
自备仪器和用品:
低温离心机、水浴锅、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、和蒸馏水。
粗酶液提取:
1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(ml)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1ml 试剂
一)进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心 10min,取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(ml)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加
入 1ml 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔7 秒,总时间3min);然后 8000g,
4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
3. 血清等液体:直接测定。
GSH 测定操作:
1. 分光光度计/酶标仪预热 30min,调节波长到 412 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二置于 25℃(一般物种)或者 37℃(哺乳动物)水浴中保温 30min。