本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预包被抗兔血红蛋白 （Hb）抗
体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入兔血红蛋白 （Hb）校准品和待测样本，再加入另一株
HRP 标记的抗兔血红蛋白 （Hb）抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组
分，在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A 和 B，底物在 HRP
催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪 450nm 波
长上测定吸光度（OD 值），吸光度（OD 值）与待测样品中兔血红蛋白 （Hb）的浓度正相关。
拟合校准品曲线，可以计算出样本中兔血红蛋白 （Hb）的浓度。
试剂盒限制性
1、仅供科研使用，不得用于临床诊断。
2、在试剂盒标示的有效期内使用，过期产品不得使用。
3、跟其他厂家的试剂盒或者组分不能混用。
4、使用试剂盒配套的样品稀释液。
5、如果样本值高于最高标准品浓度值，请将样本适当稀释后，再重新测定。
6、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果，检测前，请排出该因素。
7、通过其他方法得到的检测结果，与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。
技术提示
1、混合蛋白溶液时，避免起泡。
2、加校准品与样本时，每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头，公共组分应该悬臂加样，
避免交叉污染。
3、合适的温育时间，和充分的洗涤步骤，是保证实验结果准确性的必要条件。
4、使用自动洗板机时，加入一个 30 秒浸泡的步骤，可以提高检测精度。
5、底物溶液为无色液体，保存过程中变为蓝色，代表底物溶液已经失效，不得使用。
6、终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致，加入终止液后，蓝色底物产物，会瞬间变为黄
色。
7、实验中，用剩的板条，应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
8、所有液体组分，使用前充分摇匀，严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温
育操作。
试剂盒组分与保存
2
仅供科研使用，不得用于临床诊断。仅供科研使用，不得用于临床诊断。
3
未开封的试剂盒保存在 2-8 度，不得使用过期试剂盒。
组分 数量 主要成分 开封后储存
校准品 0.3ml/管 -- 2-8℃14 天
包被微孔板 96T/48T 预包被固相抗体 2-8℃14 天
HRP 标记抗体 10mL HRP 标记的检测抗体 2-8℃14 天
样本稀释液 6mL -- 2-8℃180 天
底物液 A 6mL 0.01%过氧化氢 2-8℃180 天
底物液 B 6mL 0.1%TMB 2-8℃180 天
终止液 6mL 2mol/L 稀硫酸 2-8℃180 天
20×浓缩洗涤液 25mL 0.05%Tween20 2-8℃180 天
说明书 1 份 -- --
自封袋 1 个 -- --
不干胶 2 片 -- --
校准品浓度依次为：16、 8、 4、 2、 1、 0.5 ug/ml。
其他用品
1、酶标仪（450nm）
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml 量筒
生物安全
1、检测必须符合实验室管理规范的规定，严格防止交叉污染，所有样品、洗弃液和各种废弃
物都应按照传染物进行处置。
2、试剂盒的液体组分中，含有 proclin-300 防腐剂，可能引起皮肤过敏反应，避免吸入烟雾
与皮肤接触。
3、底物液对皮肤、眼睛和上呼吸道有刺激作用，避免吸入烟雾。
4、戴上防护手套，实验完成后彻底洗手。
样品的采集和储存
